Subzelluläre Lokalisation der Collapsin Response Mediator Proteine in Lipid Rafts und die Beziehung von CRMP-4 zum Actincytoskelett

Abstract

In dieser Arbeit wurde gezeigt, dass CRMP-1, CRMP-2, CRMP-3, CRMP-4 und CRMP-5 in Lipid Rafts lokalisiert sind. Ebenfalls wurde gezeigt, dass CRMP-4 mit F-Actin und ß-Tubulin kolokalisiert. Außerdem wurde eine direkte Interaktion von CRMP-4 mit F-Actin durch Bindungsstudien in vitro gezeigt. Dabei führte CRMP-4 zur Bündelung von Actinfasern. Die Bindung von CRMP-4 an F-Actin in der Zelle ist vom Phosphorylierungszustand abhängig. Die Aktivierung der Proteinkinasen C und A bewirkten eine Reduktion der Kolokalisation von CRMP-4 mit F-Actin. Eine ähnliche Wirkung hatte die Hemmung von Proteinphosphatasen. Die Beobachtung lebender Zellen zeigte eine dynamische Verteilung eines GFP-CRMP-4 Fusionsproteins am Leitsaum migrierender Zellen. Funktionell führte die Überexpression von CRMP-4 zu einer Hemmung der Migration von B-35-Neuroblastomzellen.