Prostaglandin-EP₃-Rezeptor-vermittelte Hemmung der Monoamin-Freisetzung in Nagergewebe

Abstract

Ziel dieser Arbeit war es zu zeigen, welcher EP-Rezeptor-Subtyp die präsynaptische inhibitorische Wirkung von Prostaglandinen auf die Freisetzung der Transmitter Noradrenalin und Serotonin vermittelt. Insbesondere sollte der EP₃-Rezeptoren Antagonist L 826266 genauer untersucht werden. Außerdem wurde geprüft, ob Prostaglandin E₂ auch die Azetylcholinfreisetzung in zentralen cholinergen Neuronen und die Dopaminfreisetzung in der Retina hemmt. <br /> Verschiedene Präparationen zentraler und peripherer Gewebe von drei Species wurden zu diesem Zweck mit [³H]-Noradrenalin, [³H]-Serotonin oder [³H]-Cholin inkubiert und die durch elektrische Feldstimulation freigesetzte Menge an [³H] als Maß für die <em>quasi-physiologische</em> Transmitter-Freisetzung gemessen. <br /> Es zeigte sich, dass die Noradrenalinfreisetzung im Kortex der Ratte und der Maus sowie im Samenleiter der Ratte und die Serotoninfreisetzung im Rattenkortex durch Prostaglandin E₂ und sein Analogon Sulproston gehemmt wurde. In jedem der vier Modelle führte der EP₃-Rezeptor-Antagonist L 826266 zur Rechtsverschiebung der Konzentrations-Wirkungs-Kurven von Sulproston; dessen Maximaleffekt wurde jedoch nicht verändert. Die Wirkungsstärken, ausgedrückt als pA₂, beruhen auf einem sog. Schild-Plot mit einer Steigung von 1, somit konnte der kompetitive Antagonismus von L 826266 erstmalig gezeigt werden. Mithilfe des selektiven Antagonisten L 826266 konnte bewiesen werden, dass der die Hemmwirkung von Prostaglandin E₂ und Sulproston vermittelnde Rezeptor ein EP₃-Rezeptor ist. <br /> Die Äquilibrierungszeit für L 826266 wurde für jede Versuchsbedingung individuell bestimmt (1,5 bis 6,5 h) und das Handling von L 826266 zeigte sich aufgrund der chemischen Eigenschaften erschwert. <br /> Die Freisetzung von [³H]-Azetylcholin (das aus dem aufgenommenen [³H]-Cholin gebildet wurde) aus Neuronen von Striatum, Hippokampus und Kortex der Ratte wurde durch Prostaglandin E₂ nicht beeinflusst; auch nicht bei Blockierung der Muskarin2/4-Autorezeptoren durch AF-DX 384. Allerdings führte der Muskarin-Rezeptor-Agonist Oxotremorin, der als Positivkontrolle diente, in allen drei Hirnregionen in Abwesenheit von AF-DX 384 erwartungsgemäß zu einem Hemmeffekt. Die Freisetzung von [³H]-Noradrenalin (das in der Retina des Meerschweinchens ausschließlich in die dopaminergen Amakrinzellen transportiert wird und dessen Freisetzung einer<em> quasi-physiologischen</em> Dopaminfreisetzung entspricht) wurde durch Prostaglandin E₂ nicht beeinflusst. Allerdings bewirkte der Cannabinoid-CB₁-Rezeptor- Agonist WIN 55,212-2, der als Positivkontrolle mitgeführt wurde, die erwartete Hemmung.