Untersuchung der relativen Expressionsänderung von Tyrosinkinasen bei der Ausreifung Dendritischer Zellen

Abstract

Dendritische Zellen (DCs) spielen bei Anti-Tumor-Immuntherapien durch ihre Eigenschaft der effektiven Präsentation und Interaktion mit T-Effektorzellen eine zentrale Rolle. Ein Ansatz zur Verbesserung bestehender Therapien ist es, die Wirksamkeit der Ausreifungsstimuli Dendritischer Zellen zu erhöhen. Um neue Ansatzmöglichkeiten für die Regulierung der DC-Ausreifung zu finden, wurde in dieser Arbeit die Veränderung der Tyrosinkinasen (TK)-Expression anhand der intrazellulär vorhandenen spezifischen mRNA-Kopien im Hinblick auf verschiedene Ausreifungsstimuli untersucht.<br /> Im Rahmen einer Zellkultur wurden die DCs auf vier aufeinander aufbauende Arten zur Ausreifung stimuliert und nach einer Real-Time PCR Analyse in Relation zueinander gesetzt. Dadurch konnte der für eine Expressionsänderung verantwortliche Stimulationsschritt identifiziert werden.<br /> Im Zusammenhang mit den von uns definierten Qualitätskriterien konnte bei fünf TK eine deutliche Expressionsänderung beobachtet werden. Die Tyrosinkinasen ALK, EPHB6 und FGFR1 wurden in der mit RNA der Pankreaskarzinomzelllinie DAN-G elektroporierten Probe verstärkt exprimiert, während die TK JAK3 und ROR2 in selbiger im Vergleich zur Referenzprobe vermindert waren.<br /> Eine Einordnung der Ergebnisse in Zusammenhänge der bekannten Signaltransduktionswege (Pathways) der Zelle war nur eingeschränkt möglich. In der Literatur wird nur eine Zusammenarbeit der TK ALK und JAK3 in ALK-positiven Tumoren bei der Aktivierung des Onkogens Stat3 vermutet. Als interessant erwies sich ein Forschungsergebnis von Yamaoka et al. (2005), welches ein verlängertes Überleben JAK3-negativer DCs beschreibt. Demnach könnte die beschriebene Minderexpression von JAK3 zu einem verlängerten Überleben der Zellen dieser Probe führen, was im Hinblick auf die Verbesserung von Anti-Tumor-Immuntherapien als positiv zu bewerten wäre.<br /> Im Rahmen der wachsenden Kenntnis der regulatorischen Zusammenhänge der zellulären Signalwege könnten in Zukunft bestimmte Tyrosinkinasen als Angriffspunkte für die pharmakologische Intervention in den Ausreifungsprozess der DCs genutzt werden.