Entwicklung neuer Adenin- und Adenosin-Rezeptorliganden als pharmakologische Werkzeuge und Proteomik-Methoden zur Identifizierung des humanen Adeninrezeptors

Abstract

Im Rahmen dieser Arbeit wurde eine Serie von N⁶-, 8- und 9-substituierten Adeninderivaten als Adeninrezeptorliganden und 1,8-disubstituierten Xanthinderivaten als A_2B-Rezeptorliganden synthetisiert. Die neu dargestellten Verbindungen wurden im Arbeitskreis in Radioligand-Rezeptor-Bindungsstudien und funktionellen Experimenten auf ihre pharmakologischen Eigenschaften untersucht. Unter den Adeninderivaten, die entwickelt wurden, befinden sich der erste in der Literatur bekannte Adeninrezeptor-Antagonist und die erste Serie von Adeninrezeptor-Agonisten mit nanomolaren Affinitäten. Die dargestellten Xanthinderivate zeigen größtenteils subnanomolare Affinitäten am A_2B-Rezeptor und ein sehr gutes Selektivitätsprofil gegenüber den anderen bekannten Adenosinrezeptor-Subtypen, sodass in dieser Arbeit der affinste bislang bekannte A_2B-Rezeptor-Antagonist und der erste in der Literatur beschriebene spezifische A_2B-Rezeptor-Antagonist dargestellt werden konnten. Auf der Basis dieser Daten wurde ferner der erste A_2B-spezifische Radioligand entwickelt.<br /> In einem weiteren Projekt wurden im Rahmen eines sechsmonatigen Forschungsaufenthalts in der Arbeitsgruppe von Dr. Sonja Hess am California Institute of Technology (Pasadena, CA, USA) Proteomik-Methoden entwickelt, um den humanen Adeninrezeptor spezifisch mittels Liganden-Affinitätschromatographie aus HEK293-Zellen anzureichern und die Proteinsequenz nach proteolytischem Verdau massenspektrometrisch zu analysieren. Ferner wurden Proteomik-Methoden entwickelt, um Transmembranproteine, palmitoylierte Proteine sowie glycosylierte Proteine aus HEK293-Zellen anzureichern und massenspektrometrisch zu analysieren.